期刊简介
本刊是由首都医科大学口腔医学院主办，国内外公开发行的口腔医学专业学术性期刊，主编是王邦康教授，编委会由全国各大口腔医学院校各学科专家组成，被评为中国科技核心期刊，中国科技论文统计源期刊。本刊宗旨是紧密跟踪口腔医学科技发展，加强口腔专业有关新理论、新技术、新工艺等方面信息的报道和交流，促进口腔医学事业的发展。主要栏目有论著、临床报道、病例讨论、文献综述、国内外动态等。读者主要是各级口腔医疗、护理、教学、科研等方面人员以及研究生、大学生等。
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首页>北京口腔医学杂志
- 杂志名称：北京口腔医学杂志
- 主管单位：北京市卫生局
- 主办单位：首都医科大附属北京口腔医院，北京口腔医学会
- 国际刊号：1006-673X
- 国内刊号：11-3639/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：北京市期刊最佳编辑质量奖（04）期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中)
构建EIF5 A2基因敲除Cal27细胞株及功能分析
刘艳艳；胡晔华；王凤光；汪育苗；刘娜；袁晓红
关键词：EIF5A2, CRISPR/Cas9, 口腔鳞状细胞癌, 基因敲除, 迁移
摘要：目的 运用CRISPR/Cas9技术构建EIF5A2基因敲除Cal27细胞系,观察EIF5A2在口腔鳞状细胞癌增殖与迁移中的作用.方法 根据EIF5A2基因结构域,设计2个CRISPR靶向位点,利用pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin构建2个导向RNA(sgRNA)质粒.将sgRNA质粒与pST1374-NLS-flag-linker-Cas9共转染至Cal27细胞中,用嘌呤霉素和杀稻瘟菌素筛选,并挑取单克隆.将单克隆细胞的DNA进行目的片段扩增,经凝胶电泳及测序鉴定后筛选出大片段敲除细胞株Cal27-2C5及碱基突变株Cal27-2D1.real time PCR及WesternBlot鉴定两株细胞系中EIF5A2的表达情况.用Transwell实验及CCK8分别检测EIF5A2敲除对Cal27细胞的体外迁移能力及体外增殖能力的影响.结果 与对照组相比,Cal27-2C5及Cal27-2D1细胞株中EIF5A2在mRNA水平上表达均明显降低.在蛋白水平上,Cal27-2C5及Cal27-2D1细胞株中EIF5A2蛋白均基本不表达.敲除EIF5A2可明显降低Cal27细胞的体外迁移能力,而对Cal27细胞体外增殖能力没有明显影响.结论 成功构建EIF5A2基因敲除Cal27细胞株Cal27-2C5和Cal27-2D1,并初步验证EIF5A2可以影响Cal27细胞的体外迁移能力.
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